技術(shù)領(lǐng)域
一種高消化率蘇丹草新品系的分子標記輔助培育方法屬于農(nóng)作物良種培育技術(shù),更具體的說是一種通過分子標記輔助來培育高消化率蘇丹草新品系的方法。
背景技術(shù):
高粱褐色中脈是一種葉脈和莖桿木質(zhì)部的變異現(xiàn)象。這種突變體比普通的白色中脈高粱相比消化率提高40%-60%,適口性明顯改善,各種放牧家畜特別喜食,同樣的飼喂量可獲得更高的經(jīng)濟效益。褐色中脈類型有三十多種,而其中消化率最高的為bmr-6類型。常規(guī)的培育褐色中脈(bmr-6類型)蘇丹草的方法是利用褐色中脈的高粱品系與普通蘇丹草品系進行雜交,通過其后代的褐色中脈表型特征來進行選擇。由于褐色中脈是隱性性狀,因此在通過回交的方式將該性狀導(dǎo)入蘇丹草中時,需要雜交1次,回交3次、自交3次。這種方法所需時間長且費工費時,即使加上海南島的冬季加代繁殖也需要3年時間。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是將分子標記輔助的方法引人雜交育種的過程,來培育高消化率的蘇丹草新品系,以期加快育種的進程,提高育種的工作效率。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
1.一種高消化率蘇丹草新品系的分子標記輔助培育方法,其特征在于,它包括如下步驟:
①高消化率品系雜交:利用含有bmr-6基因,其標志性狀為褐色中脈的高粱品系與非褐色中脈的蘇丹草品系雜交;
②第一次回交:以雜交種為母本,非褐色中脈的蘇丹草為父本進行回交,獲得BC1F1;
③后代單株分子標記鑒定:在BC1F1世代,分單株提取DNA,對攜帶褐色中脈基因的單株進行PCR擴增鑒定;
④第二次回交:以攜帶bmr-6基因的單株為母本,非褐色中脈的蘇丹草品系為父本進行回交得BC2F1;
⑤第二次分子標記鑒定和第三次回交:利用與步驟③相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的單株為母本,非褐色中脈的蘇丹草品系為父本進行回交得BC3F1;
⑥第三次分子標記鑒定和自交選擇:利用與步驟③相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的BC3F1植株然后自交,在自交后代中選擇具有褐色中脈表型的單株即可獲得高消化率的蘇丹草新品系。
本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明在雜交、回交和自交等育種方法的基礎(chǔ)上,加入了分子標記鑒定技術(shù),對帶有bmr-6基因進行提前選擇,因此能加快育種進程。本方法操作簡便、容易,能夠加快育種進程。本方法也可用于高消化率高粱品系的培育。
具體實施方式:
下面結(jié)合具體實例對本發(fā)明進行進一步的描述。
實施例1:高消化率的蘇丹草品系的分子標記輔助培育
1.高消化率品系雜交:利用褐色中脈高粱品系U68(bmr-6類型)與蘇丹草品系S722雜交。
2.第一次回交:以雜交種為母本,蘇丹草品系S722為父本進行回交,獲得BC1F1。
3.后代單株分子標記鑒定:BC1F1世代種20株,分單株提取DNA,對攜帶褐色中脈基因的單株進行PCR擴增鑒定。
4.第二次回交:以攜帶bmr-6基因的單株為母本,蘇丹草品系S722為父本進行回交得BC2F1。
5.第二次分子標記鑒定和第三次回交:利用與步驟3相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的單株為母本,蘇丹草品系S722為父本進行回交得BC3F1。
6.第三次分子標記鑒定和自交選擇:利用與步驟3相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的BC3F1植株然后自交,在自交后代中選擇具有褐色中脈表型的單株即可獲得高消化率的蘇丹草新品系。
通過以上步驟獲得了高消化率的蘇丹草新品系S722-bmr6。相比于常規(guī)的利用表型鑒定進行回交的方法,本方法節(jié)省了一年時間。
實施例2:高消化率的高粱品系的分子標記輔助培育
1.高消化率品系雜交:利用褐色中脈高粱品系U68(bmr-6類型)與高粱品系Tx623B雜交。
2.第一次回交:以雜交種為母本,高粱Tx623B為父本進行回交,獲得BC1F1。
3.后代單株分子標記鑒定:BC1F1世代種20株,分單株提取DNA,對攜帶褐色中脈基因的單株進行PCR擴增鑒定。
4.第二次回交:以攜帶bmr-6基因的單株為母本,普通高粱品系為父本進行回交得BC2F1。
5.第二次分子標記鑒定和第三次回交:利用與步驟3相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的單株為母本,普通高粱品系為父本進行回交得BC3F1。
6.第三次分子標記鑒定和自交選擇:利用與步驟3相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的BC3F1植株然后自交,在自交后代中選擇具有褐色中脈表型的單株即可獲得高消化率的高粱新品系。
通過以上步驟獲得了高消化率的高粱品系Tx623B-bmr6。相比于常規(guī)的利用表型鑒定的方法,本方法節(jié)省了一年時間。
1.一種高消化率蘇丹草新品系的分子標記輔助培育方法,其特征在于,它包括如下步驟:
①高消化率品系雜交:利用含有bmr-6基因,其標志性狀為褐色中脈的高粱品系與非褐色中脈的蘇丹草品系雜交;
②第一次回交:以雜交種為母本,非褐色中脈的蘇丹草為父本進行回交,獲得BC1F1;
③后代單株分子標記鑒定:在BC1F1世代,分單株提取DNA,對攜帶褐色中脈基因的單株進行PCR擴增鑒定;
④第二次回交:以攜帶bmr-6基因的單株為母本,非褐色中脈的蘇丹草品系為父本進行回交得BC2F1;
⑤第二次分子標記鑒定和第三次回交:利用與步驟③相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的單株為母本,非褐色中脈的蘇丹草品系為父本進行回交得BC3F1;
⑥第三次分子標記鑒定和自交選擇:利用與步驟③相同的方法鑒定出攜帶bmr-6基因的BC3F1植株然后自交,在自交后代中選擇具有褐色中脈表型的單株即可獲得高消化率的蘇丹草新品系。